Qubit 4.0熒光計是Thermo Fisher Scientific公司推出的一款高靈敏度、高特異性的定量儀器，專用于精確測量DNA、RNA、蛋白質等生物分子的濃度。以下是其核心特點和使用方法的總結：

一、適用檢測類型

1、核酸定量

DNA：dsDNA（雙鏈）、ssDNA（單鏈）、microRNA、小片段DNA（如NGS文庫）。

RNA：總RNA、mRNA等。

靈敏度：可檢測低至0.5 pg/μL（高靈敏度試劑）至100 ng/μL（寬范圍試劑）。

二、蛋白質定量

兼容多種熒光染料（如Qubit Protein Assay Kit），適合低濃度樣本（0.05–5 mg/mL）。

三、Qubit4.0熒光計核心優勢

1、高特異性：熒光染料僅結合目標分子（如dsDNA），避免污染物（如鹽、游離核苷酸）干擾。

2、高靈敏度：比紫外分光光度法（Nanodrop）更準確，尤其適用于低濃度或復雜樣本。

3、操作簡便：觸摸屏界面，預置標準曲線，無需用戶校準。

四、操作步驟

1、試劑準備

選擇對應的檢測試劑盒（如Qubit dsDNA HS Assay Kit）。

將熒光染料與緩沖液按比例混合，配制工作液。

2、標準品檢測

使用試劑盒提供的標準品（通常2個濃度點）建立標準曲線。

3、樣本檢測

將1–20 μL樣本與工作液混合，室溫孵育2–5分鐘。

插入Qubit 4.0，選擇對應檢測程序，讀取濃度。

4、數據分析

儀器自動計算濃度，結果可直接導出或保存。

五、注意事項

1、樣本體積：推薦使用1–20 μL，濃度需在試劑檢測范圍內。

2、避免污染：手套操作，防止RNase/DNase污染（核酸檢測時）。

3、染料特異性：不同分子需匹配專用染料（如RNA檢測不可用dsDNA染料）。

4、動態范圍：超出范圍時需稀釋或換用寬范圍試劑。